犬冠状病毒基因重组抗原间接ELISA检测方法的研究

摘要

以在E.coli高效表达的犬冠状病毒核蛋白为抗原,用辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗犬IgG为二抗,建立了检测犬冠状病毒抗体的间接ELISA方法.经方阵滴定确定出最佳反应条件为1μg/孔纯化的E.coli表达的重组N蛋白抗原包被酶标板,用10﹪的兔血清进行封闭,以正常E.coli裂解上清液稀释待检血清.结果表明应用重组N蛋白作为诊断用抗原具有特异性强、稳定性高、成本较低等特点.