牧羊犬耳皮肤类干细胞的分离与培养

摘要

本试验对牧羊犬耳皮肤组织采用0.1﹪胶原酶消化组织法进行原代培养,获得了皮肤类干细胞集落,并对各代细胞进行了常规冷冻保存和生物学特性观察.皮肤类干细胞集落有多种表现形式如鸟巢状、岛状、山脊状等,而且出现了毛发状细胞、多角型细胞、神经细胞样细胞等.血清可促进皮肤类干细胞的生长及细胞集落的形成.皮肤类干细胞集落在不同饲养层及培养基质上的生长行为不同,细胞集落在黇鹿成纤维细胞饲养层形成快,存在时间短,混合传代共培养无重新细胞集落出现;在SD大鼠心肌细胞饲养层上形成慢,但存在时间长,传代后又有细胞集落出现;明胶能促进皮肤类干细胞贴壁生长.皮肤类干细胞集落传代后可重新出现,且退化时不漂浮;黇鹿成纤维细胞集落传代培养后无细胞集落重新出现.