应用RT-PCR技术检测H5N1型禽流感病毒

摘要

目的：高致病性禽流感病毒已给家禽业和人类造成很大危害,为提高禽流感病毒的检出率,减少病毒分离和血凝测定等方法中接触病毒的危险,我们将设计特异性引物,建立RT-PCR检测方法,并用于H5N1型高致病性禽流感病毒的检测。 方法：查找H5N1的基因序列,利用计算机软件设计引物,通过确定反应混合物的浓度和反应条件,建立特异性的RT-PCR方法。 结果：在基因文库中查找了H5N1禽流感病毒的基因序列(AF148678；A/Goose/Guangdong/1/96/H5N1),从H5N1血凝素基因片段中设计了一对特异性引物,并建立了一整套从病毒RNA抽提、反转录到PCR反应的快速检测H5N1型高致病性禽流感病毒的方法,扩增出了237bp的目的片段.并已用于禽流感疾病模型中检测各组织中的病毒含量。