多拷贝人C肽基因的构建及其在大肠杆菌中的高效表达

摘要

目的:构建多拷贝的人C肽基因,选用合适的表达载体,以多拷贝基因的形式在大肠杆菌中高效表达人C肽. 方法:采用PCR,克隆,DNA序列分析,IPTG诱导表达,亲和层析等方法. 结果:构建成含5拷贝C肽基因的重组pET-30a表达载体,经转化及诱导,在大肠杆菌中高效稳定表达可溶性的带6个组氨酸标签的C肽融合蛋白. 结论:在大肠杆菌中获得了人C肽的高表达,为下一步C肽的功能研究创造了重要条件.