凝血栓蛋白-1Ⅰ型重复序列对人血管内皮细胞增殖影响的研究

摘要

目的:探讨血管新生抑制因子-凝血栓蛋白-1对人血管内皮细胞增殖的影响，从而了解其在新血管生成中的抑制作用。rn 方法:构建凝血栓蛋白-1Ⅰ型重复序列真核表达载体pcDNA3.1+/TSP-1Ⅰ型重复序列，转染人血管内皮细胞，采用MTT法检测转染前后血管内皮细胞生长活性及转染后血管内皮细胞培养上清液对血管内皮细胞生长的影响;采用流武细胞仪检测转染前后血管内皮细胞细胞周期的变化。rn 结果:成功构建了pcDNA3.1+/TSP-1Ⅰ型重复序列真核表达载体;pcDNA3.1+/TSP-1Ⅰ型重复序列转染ECV304人血管内皮细胞后，MTT法检测其OD值较未转染组和pcDNA3.1+空载体转染组减低(P=0.03和P=0.023);pcDNA3.1+/TSP-1Ⅰ型重复序列转染ECV304细胞后细胞培养上清液作用ECV304细胞48小时后其MTT法检测所得OD值较未转染组和pcDNA3.1+空载体转染组细胞培养上清液作用ECV304细胞48小时后的OD值减低(P=0.003和P=0.034);流式细胞仪检测结果显示：pcD-NA3.1+/TSP-1Ⅰ型重复序列转染ECV304细胞后S+G2(%)较未转染组和pcDNA3.1+空载体转染组S+G2(%)缩短(P=0.03和P=0.011)。rn 结论:凝血栓蛋白-1Ⅰ型重复序列能够抑制人血管内皮细胞的增殖。