从促进肠道生长抑素分泌的角度揭示姜黄素抗类风湿关节炎的机制

摘要

目的:从促进肠道生长抑素分泌的角度,阐明姜黄素抑制类风湿关节炎(RA)的作用模式和机制,为其开发利用提供依据.rn 方法:建立大鼠佐剂诱导的关节炎模型,考察姜黄素的治疗作用;采用Q-PCR及ELISA法检测血管活性肠肽、SOM、胃泌素释放肽和P物质mRNA及蛋白水平;LC/MS/MS法检测姜黄素灌胃给药后Cmax;免疫组化法检测不同肠段D细胞数目.rn 结果:姜黄素灌胃给药明显降低AIA大鼠临床积分,减轻原发性和继发性足肿胀,显著减少滑膜组织炎细胞浸润,抑制滑膜增生,并阻止关节骨/软骨破坏.ELISA检测结果显示,姜黄素明显上调AIA大鼠血清、小肠和滑膜组织中SOM水平,下调SP水平;Q-PCR检测结果显示,姜黄素明显下调大鼠小肠和滑膜组织SP mRNA水平,上调小肠组织SOM mRNA水平.斯皮尔曼等级相关分析显示，姜黄素上调滑膜组织SOM水平与抗关节炎活性紧密相关;联合使用非特异性SOM受体拮抗剂环生长抑素或SOM耗竭剂半胱胺，几乎完全逆转姜黄素的抗关节炎作用，明显减弱其对炎性因子水平的下调作用，表明SOM是姜黄素抗关节炎作用的重要中介。进一步研究发现，AIA大鼠灌胃给予姜黄素后其Cmax约为0.03μM。然而在该浓度或10μM时，姜黄素对AIA大鼠滑膜细胞分泌SOM并无明显的影响，提示滑膜组织SOM水平的升高可能并非源于滑膜细胞的自身合成增加。考虑到循环中SOM主要来自于胃肠道，且90%的SOM储存于肠道粘膜层D细胞内，故采用免疫组化法考察了姜黄素对不同肠段D细胞数目的影响，发现其明显增多十二指肠和空肠段的D细胞数目。此外，ELISA检测结果显示姜黄素能够时间和浓度依赖性地促进STC-1细胞分泌SOM。rn 结论:姜黄素灌胃给药显著抑制大鼠AIA，其作用并非通过吸收入血或以前药形式体现，而是呈现肠道依赖的特点。姜黄素灌胃给药后显著增加小肠D细胞的数目，促进肠道内分泌细胞分泌SOM，后者进入血液循环及滑膜组织，改善全身性免疫异常和炎症反应，减轻滑膜炎症，阻止关节骨/软骨破坏。