聚（L-赖氨酸）-聚乙二醇-聚（L-赖氨酸）的合成及表征

摘要

功能基因组时代的到来，对基因治疗的研究产生了巨大的推动作用。运送载体的局限性使得目前对疾病基因治疗的目标无法完美实现。聚阳离子由于带正电易与DNA 结合而被开发为非病毒载体，但是单一的聚阳离子片段在生物体内易发生聚集被原生质体清除，改进方法是与分散性和生物相容性都很好的聚乙二醇（PEG ）片段共聚，可增加其分散性和循环时间。 本文所选用的阳离子片段是生物可降解性的聚赖氨酸，降解产物是人体生存必需的氨基酸。设计成PLL-PEG-PLL 的三嵌段结构，增加阳离子片段的长度，希望能更好的压缩DNA ，利于形成的复合物进入细胞。合成过程以N ε -苄氧羰基赖氨酸与三光气为原料，反应生成环化酸酐。环化酸酐与双端氨基聚乙二醇发生开环聚合生成聚（N ε -苄氧羰基赖氨酸）-聚乙二醇-聚（N ε -苄氧羰基赖氨酸），由于加入环化酸酐和PEG 的比例不同，得到阳离子片段长度不同的共聚物。在33﹪溴化氢乙酸溶液中去保护基团，生成聚赖氨酸-聚乙二醇-聚赖氨酸三嵌段共聚物（PLL-PEG-PLL ），红外和核磁检测显示苄氧羰基已去除，并根据核磁结果计算出产物的聚合度。将PLL-PEG-PLL 和DNA 按电荷化学计量比(r ＝[lysineresidue]/[nucleotide])进行混合后静置，形成复合物胶束。电泳检测证明r ≥1 时能够完全包覆。分别对细胞系SF9 和HEK293 进行转染，发现共聚物中聚阳离子片段长度不同，转染效果不同。对比Polymer3 转染不同细胞系，SF9 的转染效果要明显好于HEK293 。