插入突变法探索鲍曼不动杆菌对替加环素非主动外排的其他耐药机制

摘要

目的:探索影响鲍曼不动杆菌对替加环素耐药性变化的因素.rn 方法:通过电转化法构建鲍曼不动杆菌的EZ-Tn5插入突变株库,对转化子进行替加环素敏感性测定,筛选出替加环素耐药菌株,反向PCR技术分析替加环素耐药突变株的侧翼序列.rn 结果:共挑选并保存了656株突变株构建鲍曼不动杆菌Tn5插入突变株文库.Tn5插入突变株文库中共筛选出25株替加环素耐药鲍曼不动杆菌,随机选取其中的12株进行反向PCR、测序分析,其中有3株插入dinB基因,1株插入23S rRNA基因,1株插入SMP-30基因,1株插入OmpW基因,1株插入PqqE基因,1株插入LidP基因;4株插入未知功能蛋白基因.rn 结论:成功构建鲍曼不动杆菌Tn5插入突变株文库.首次在鲍曼不动杆菌中发现可能介导对替加环素耐药的几个新的基因,其具体耐药机制尚需进一步研究.