鲍曼不动杆菌分子特征及其在替加环素压力下外排泵表达的变化

摘要

目的鲍曼不动杆菌是医院内感染常见的细菌。文中旨在分析其分子流行特征,检测外排泵和调节蛋白基因的携带率,并研究替加环素对外排泵和调节蛋白基因表达的影响。方法选取2017年5月至2019年3月江苏大学附属医院住院患者183株鲍曼不动杆菌。分为耐药组(一类及以上抗菌药物耐药的菌株,139株),敏感组(药敏试验中的药物均为非耐药的菌株,44株)。应用重复序列PCR作菌株的同源性分析,并以脉冲场凝胶电泳(PFGE)为同源性分析的金标准对部分菌株进行验证和比较。PCR检测耐药相关基因。依据同源性分析、外排泵携带率检测及药敏试验结果,选取6株外排泵基因全携带但耐药表型不同的临床菌株作为实验株,包括敏感株(SAB)、多药耐药株(MDRAB)、广泛耐药株(XDRAB),进行替加环素体外诱导,诱导后的菌株为诱导组,以不含替加环素LB培养的相同菌株为对照组。检测AdeB、TetB等外排泵基因及AdeS、BaeS等调节蛋白的基因表达变化。结果同源性分析显示,183株临床分离株包含有45个克隆群。耐药组AdeB、TetB基因(97.84%、98.56%)检出率均高于敏感组(63.64%、20.45%),CraA、AbeM等基因亦高于敏感组(P<0.05)。替加环素诱导前MDRAB、XDRAB中AdeB(4.17±0.94、6.86±3.23)、TetB(13.06±0.38、13.96±0.63)表达较SAB(0.00±3.70、0.00±0.70)升高(P<0.05),MDRAB菌株中MacB、BaeS表达较SAB菌株亦升高(P<0.05)。MDRAB、XDRAB菌株中AbaQ表达较SAB菌株降低(P<0.05)。诱导组AdeB、TetB在各菌株的表达较对照组明显升高(P<0.01);除SAB1菌株外,AbaQ、AbeM在其余菌株中的表达较对照组明显升高(P<0.05);AdeS在SAB1、SAB2、MDRAB1、XDRAB2菌株中的表达较对照组升高(P<0.05);负调节蛋白SoxR在SAB1、XDRAB1菌株中表达较对照组降低(P<0.05)。结论AdeB、TetB、AbeS、AdeS、BaeS在临床鲍曼不动杆菌多药耐药过程中发挥着重要的作用,其中AdeB和TetB在菌株对替加环素耐药过程中的作用尤为明显,可能是替加环素耐药的优势外排泵基因。