炎症因子TNF-α通过Wnt/β-catenin信号途径促进小鼠肺癌发展

摘要

目的：明确炎症因子TNF-α否通过Wnt/β-catenin信号途径促进小鼠肺癌发展。rn 方法：利用尾静脉注射小鼠肺肿瘤细胞LLC细胞方法建立小鼠肺癌模型,然后采用香烟对其进行刺激,诱发炎症反应.免疫组化方法检测小鼠和人肺肿瘤组织中CD68、TNF-α和unphosphorylatedβ-catenin的表达.采用Transwell(@)插入式细胞培养皿共培养人巨噬细胞和人肺癌细胞株A549细胞.采用Western blot法检测A549细胞中unphosphorylatedβ-catenin的表达及磷酸化的GSK-3β和Akt蛋白的表达.rn 结果：免疫组化结果显示,香烟刺激肺肿瘤负荷小鼠后,其肿瘤组织中巨噬细胞(CD68阳性)、TNF-α和unphosphorylatedβ-catenin的表达均明显高于对照组.肺癌病人肿瘤组织中,CD68和TNF-α的阳性表达均明显高于正常组织.肺腺癌和鳞癌的unphosphorylatedβ-catenin的染色阳性率分别为68.9％和62.2％.其阳性率与患者吸烟与否及肿瘤分期,有统计学意义(均p＜0.05).并且CD68阳性的细胞数在unphosphorylatedβ-catenin染色阳性标本中明显升高(p＜0.01).Western blot检测显示,不同浓度香烟抽提物(CSE)刺激共培养细胞后,A549细胞中unphosphorylatedβ-catenin的表达随着CSE浓度的增加而显著上调.在加入TNF-α中和抗体后,A549细胞中unphosphorylatedβ-catenin的表达被抑制.用TNF-Cα处理A549细胞后,磷酸化的GSK-3β和Akt蛋白在2h后表达增加,4小时后unphosphorylatedβ-catenin蛋白表达也开始上调。rn 结论：炎症免疫细胞在肿瘤组织中浸润并释放炎症因子TNF-α,进而上调肿瘤细胞中Wnt/β-catenin信号通路,这可能是炎症促进肺癌发展的机制。