硅表面免疫敏感膜制备方法研究

摘要

光纤免疫传感器由于同时具有免疫检测的特异性和光信号检测的高灵敏性，且仪器本身具有抗干扰能力强，易于微型化，适宜于各种复杂环境使用等优点，一直是生物传感器研究的一个热点，已被广泛地被应用到环境监测，食品卫生，临床检验以及反恐等领域。有关可特异性识别(俘获)靶分子的免疫敏感膜制备方法及工艺是光纤免疫传感器的研究的关键技术之一。在光纤免疫传感器中，常用的敏感膜制备方法可分为物理方法和化学方法两大类。物理方法指在成膜过程中，不发生针对生物识别元件(抗体)的化学反应。常用的方法有物理吸附法、包埋法等。化学方法是将抗体以共价键方式键合于基质表面，光纤这类石英基质表面只能提供羟基参与反应，而抗体分子表面游离的氨基、羟基、酚基、巯基、羟基、吲哚基、胍基、咪唑基等基团都可以参与反应，根据反应机理的不同，化学成膜方法又可分为直接键合成膜法和双功能试剂交联成膜法两种。直接键合成膜法直接使用活性试剂将抗体分子表面的可反应基团与光纤表面的羟基反应。BrCN法是这种方法的代表；双功能试剂本身具有两个功能基团，固定时，双功能试剂一端先与基质表面羟基反应，另一端再与抗体分子表面的活性基团反应。丙氨基三甲氧基硅烷(APTS)/戊二醛法是目前应用较多的方法。本文选择抗SEB的兔多克隆抗体作为识别元件，分别比较了物理吸附法、BrCN法、APTS/戊二醛法三种代表性的成膜方法。