犬骨髓源血管内皮祖细胞体外扩增的动态研究

摘要

目的：应用离体培养法培养骨髓来源的血管内皮祖细胞并动态观察扩增效能。rn 方法：2004.4—2004.12,地点：首都医科大学宣武医院外科实验室,老年所多肽实验室细胞培养平台。使用条件培养基和纤维连接蛋白培养骨髓单个核细胞,相差显微镜观察形态变化,测量生长曲线观察增殖能力,检测摄取Dil—ac—LDL的功能,不同时间点行flk-1、CD133和Ⅷ因子的免疫细胞化学检测和CD34,VEGFR-2及CD133的流式细胞仪检测以定性并观察扩增效率。rn 结果：集落样生长的贴壁细胞平均10天汇合,每毫升骨髓可获得大约(1.3±0.3)×106个细胞,外观鹅卵石样,能摄取Dil-ac—LDL,flk-1,CDl33和Ⅷ因子免疫细胞化学染色均呈阳性,流式细胞仪示VEGFR-2和CDl33双阳性细胞扩增达33倍。rn 结论：离体扩增培养法可成功地从骨髓中扩增EPCs,扩增效率能够满足组织工程血管对种子细胞的需要,也为骨髓单个核细胞移植治疗组织缺血提供了间接证据。