复方麻杏石甘汤对放射性肺损伤TGF-βSmad信号通路调控作用的验证研究

摘要

目的:本研究通过RNA干扰技术,特异性沉默TGF-β1基因,验证复方麻杏石甘汤通过TGF-β/Smad信号通路调控,减轻放射性肺损伤的机制.rn 方法:1、清洁级SD大鼠分为中药组和正常对照组,根据临床成人剂量的15倍灌胃3天后制备中药复方含药血清;2、细胞培养,射线照射,频率为3.64Gy/min,总剂量为8Gy;3、RNA干扰特异性沉默TGF-β1基因,PCR检测TGF-β1 mRNA;4、CCK-8法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡;5、(Western-blot)检测smad蛋白水平.rn 结果:1、与空白对照、阴性对照组比较,TGF-β1基因沉默组TGF-β1mRNA下降,差异有统计学意义(P＜0.05),针对TGF-β1基因特异性siRNA表达载体能够显著抑制靶基因的表达;2、与正常血清+siRNA组比较,含药血清+siRNA组的细胞活力下降,差异有统计学意义(P＜0.05),沉默TGF-β1基因可抑制放疗后肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖,加入含药血清仍能抑制细胞增殖;3、与正常血清+siRNA组比较,含药血清+siRNA组细胞凋亡率上升,差异有统计学意义(P＜0.05),沉默TGF-β1基因对放疗后肺泡Ⅱ型细胞凋亡无影响,加入含药血清能促进细胞凋亡;4、与大鼠血清+siRNA组比较,含药血清+siRNA 组P-Smad2、P-Smad3 下降,Smad6、Smad7上升,差异有统计学意义(P＜0.05),沉默TGF-β1基因可阻断放射性肺损伤TGF-β/smad信号通路,加入含药血清仍能传导该信号通路.rn 结论:复方麻杏石甘汤除了通过TGF-β/Smad信号通路,可能还通过调控其他信号传导通路干预放射性肺损伤.