610.牛心包脱细胞后鞣制对生物瓣材料防钙化的作用

摘要

目的：探讨将牛心包先作去细胞处理再鞣制改性处理抗钙化效果.方法：取新鲜牛心包分为四组,A组:先用0.625﹪戊二醛固定一周,随后用0.3﹪戊二醛固定60天;B组:用0625﹪戊二醛固定一周,随后用,2,3-丁二醇固定60天;C组:先用新洁尔灭-核酸酶-去氧胆酸法去细胞处理,再同B组处理;D组:新鲜对照组,将四组牛心包分别植入刚离乳的S大鼠背部皮下,60天后处死,取出埋藏试片,应用原子火焰吸收法行组织钙定量测定,HE染色做光镜检测并用电镜观察组织超微结构,分组测定抗拉强度及热皱缩温度.结果：A组牛心包试片钙平均含量(195.24±34.07μg/mg干重)显著高于其余各组(P＜0.001).C组钙平均含量(4.40±4.24μg/mg干重)与对照组(4.10±3.18μg/mg干重)相比无显著性差异(P＞0.05),与B组(22.15±8.14μg/mg干重)相比,钙化明显减轻(P＜0.001).病理组织学检查显示C组试片胶原玻变程度轻,无明显钙化;B组试片胶原有玻变,有少许点状钙化灶;而A组试片有严重胶原变性、断裂,大片钙化.A、B、C三组间热皱缩温度(分别为84.59±0.61℃;84.29±0.43℃;84.13±0.50℃)无明显差异,但与对照组(69.44±0.57℃)有显著性差异(P＜0.001).B组(29.45±5.16N/mm2)与C组(28.64±4.78N/mm2)抗拉强度无显著差异,但与新鲜对照组(17.97±4.77N/mm2)差异明显(P＜0.001).讨论生物材料的钙化和免疫反应与其细胞成分有关.本实验将去细胞和未去细胞的牛心包用戊二醛鞣制,2,3-丁二醇改性处理,比较其植入动物体内的钙化程度以及机械强度,结果发现去细胞后抗钙化效果明显增加而机械强度没有明显改变.机制可能是去细胞处理消除了牛心包上的细胞成分,从而去除了早期钙盐沉积的中心,而2,3-丁二醇的两个羟基受两侧紧邻的两个碳键的影响,结构相对不稳定,容易与醛基内聚结合,与戊二醛形成稳定的环状缩醛,阻止了游离醛基的细胞毒性作用,达到良好的抗钙化效果.结论：1.去细胞处理可明显减轻生物材料植入体内后的钙化.2.戊二醛鞣制的生物瓣材料经2,3-丁二醇改性后,可显著减轻钙化.3.去细胞处理和2,3-丁二醇改性在生物材料抗钙化方面有协同作用.4.去细胞后的牛心包材料,经戊二醛鞣制,2,3-丁二醇改性后可增强其机械强度.