亚砷酸钠对HaCaT细胞内抗氧化系统的影响

摘要

目的：探讨亚砷酸钠(NaAsO2)作用于体外培养的人皮肤角质形成细胞(HaCaT)后,细胞内谷胱甘肽(GSH)的含量、过氧化氢酶(CAT)的活性、mRNA和蛋白表达的变化情况. 方法：用荧光法测定细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG);用紫外速率直接法测定细胞内CAT的活性;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CAT的mRNA表达水平;用免疫印迹(Westernblot)方法检测CAT蛋白表达水平. 结果：2.5μmol/L以上组细胞内GSH水平增高,5μmol/L组GSSG水平增高;5μmol/L以上的NaAsO2可明显降低CAT的活性,且呈剂量-反应关系(P＜0.05);RT-PCR电泳结果可见5μmol/L以上的NaAsO2作用于细胞后CAT/β-actin光密度比值与对照组相比明显下降(P＜0.05);Westernblot结果与RT-PCR电泳结果一致. 结论：NaAsO2可诱导HaCaT细胞内的GSH增多;降低HaCaT细胞内CAT基因的mRNA及蛋白表达水平并抑制细胞内的CAT活性.