胶体金免疫层析条法检测沙门氏菌O9抗原的研究

摘要

利用针对沙门氏菌O9抗原的两株特异性单克隆抗体4-7-7和3-47-0,成功建立了一种双抗体夹心检测沙门氏菌O9抗原的胶体金免疫层析试纸条法(GICA).该法对鸡伤寒沙门氏菌LPS的最小检出量为0.15ng/条,对鸡伤寒沙门氏菌菌液的最小检出量为2×105CFU/条.蛋品的人工污染试验显示,经增菌后免疫层析试纸条可检出1CFU的肠炎沙门氏菌,在大肠杆菌与沙门氏菌比例为1000∶1时仍不干扰试纸条的检测.GICA可直接对鸡白痢病鸡进行检测,对于细菌含量较少的带菌鸡或其它待测样品,只需经过选择性增菌后,即可进行检测.对156只鸡进行了检测,鸡白痢沙门氏菌检出率为27.9﹪,与经典细菌分离鉴定法完全符合.市场采集的鸡蛋样品中GICA沙门氏菌09抗原的检出率为1.89﹪,与经典细菌分离鉴定法相比敏感度为100﹪,特异性为99.4﹪.上述结果表明,检测沙门氏菌O9抗原的GICA法快速、特异、灵敏,在医学和兽医学重要沙门氏菌病诊断方面有着潜在的广阔前景.