Lentivirus介导分泌NT-3的鼠胚基因工程神经干细胞构建及表达研究

摘要

目的:以Lentivirus为载体,构建同时表达GFP和NT-3的鼠胚基因工程NSC,以便为脊髓损伤研究提供材料. 方法:①培养和鉴定胎鼠神经干细胞(Neuralstemcell,NSC);②用携带绿色荧光蛋白(GreenFluorescenceProtein,GFP)和NT-3的lentivirus转染NSC;③用荧光显微镜、鼠胚背根神经结培养(DorsalRootGanglion,DRG)、Westernblot等方法检测基因工程NSC的转基因表达. 结果:①获得了大量的基因工程NSC;②荧光显微镜观察到几乎100﹪的基因工程NSC表达GFP;③基因工程NSC的培养液能促使DRG旺盛生长;④Westernblot检测到基因工程NSC能高效分泌NT-3蛋白. 结论:成功构建了同时携带并稳定表达GFP和NT-3的鼠胚基因工程NSC,为脊髓损伤基础研究提供有价值的细胞资源,同时为未来的临床研究奠定基础.