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pdc和adhB基因整合至pfl位点重组大肠杆菌的构建

摘要

本文为了保证外源基因表达的稳定性、减少发酵副产物的生成,利用带有运动发酵单胞菌丙酮酸脱羧酶pdc基因和乙醇脱氢酶adhB基因的pGM-TEASY载体,克隆了两段大肠杆菌丙酮酸甲酸裂解酶pfl基因片段,获得了大肠杆菌整合重组质粒,化学转化入大肠杆菌TOP10的感受态细胞,在30℃、35℃、37℃下,分别经过3代加抗生素,5代不加抗生素的转接培养后,筛选出在染色体基因组丙酮酸甲酸裂解酶pfl位点上整合了pdc基因和adhB基因的大肠肝菌的重组子.

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