打靶载体及整合外源基因至小鼠DC-SIGN外显子7位点构建BAC克隆的方法和应用

摘要

本发明属于生物技术领域，主要是一种打靶载体及整合外源基因至小鼠DC‑SIGN外显子7位点构建BAC克隆的方法和应用，一种靶向打靶载体序列如SEQ ID NO.14所示，命名为打靶载体pL451‑DCSIGN 5HA‑IRES‑DTR‑PEN‑DC SIGN 3HA。本发明提供了一个新的能实现靶向整合的位点序列，利用该位点可构建靶向插入外源基因的打靶载体，并验证了利用该打靶载体能高效整合外源基因至小鼠DC‑SIGN BAC克隆DC‑SIGN外显子7位点，后续得到的靶向插入外源基因的DC‑SIGN BAC，可以用于构建靶向插入外源基因的小鼠胚胎干细胞，从而为构建转基因细胞系以及小鼠建立了基础。