阳离子多聚物PEI结合电穿孔实现小鼠精子的核内转染的研究

摘要

核内转染效率不高是制约精子载体法成功率的主要因素之一,本实验联合运用阳离子多聚物PEI和方波电穿孔两种不同机制的转染手段,以期克服精子难转染的问题.采用FITC标记的线性阳离子多聚物JetPEI-FluoF与适量的质粒pCX-EGFP形成复合物作为转染示踪物质进行转染,通过激光共聚焦显微镜,检测复合物在细胞的分布情况.结果与对照组单纯使用PEI转染相比较,联合使用组虽然精子活力和活率有一定程度的下降,但是无论胞浆还是胞核荧光物质的携带量都有很大程度的提高,实现了对精子的核内转染.