NaCl胁迫下嫁接黄瓜叶片中特异蛋白的分离与鉴定

摘要

本文以日本引进的耐盐品种帝王新土佐南瓜为砧木、津研4号黄瓜为接穗,对嫁接植株和接穗自根植株在NaCl胁迫下叶片可溶性蛋白质进行双向电泳(2-DE)对比研究.利用光密度仪对考马斯亮蓝染色的凝胶扫描,通过PDQuest软件进行蛋白斑点检测和配比,结果表明,NaCl胁迫后2d在嫁接植株叶片内产生了16个与胁迫有关的特异蛋白质点,其表观分子量分别为110.6kD、89.7kD、76.5kD、56.4kD、49.4kD、39.6kD、36.2kD、35.8kD、34.7kD、34.4kD、34.3kD、33.4kD、22.7kD、19.8kD、15.9kD、12.9kD.对分子量为39.6kD(编号为6)的蛋白质点进行了基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析,并对结果在SwissProt45.2蛋白质数据库中进行搜索,发现其与甲基转移酶(O-methyltransferase)相匹配[序列号为P47917;分子量(Mw)为39.58kD;等电点(PI)为5.54].甲基转移酶与植物的耐盐性有关.此外,在嫁接植株叶片内的其余多数蛋白质,均表现出表达上调.以上结果表明,嫁接苗在NaCl胁迫下不仅产生了一系列新的蛋白质,而且在其余多数蛋白质的合成上均表现出上调趋势,从而增强其耐盐性.