雷帕霉素抑制TLR2诱导的炎症反应的分子机制

摘要

脂蛋白Pam3CSK4作用于TLR2能活化MAPK和NF-κB信号通路诱导炎症反应;雷帕霉素具有抑制炎症反应的作用,但其分子机制有待进一步研究。rn 目的:探讨雷帕霉素是否通过阻断MAPK和NF-κB的信号传导,抑制TLR2诱导的炎症反应。rn 方法:雷帕霉素预处理THP1细胞,再加入Pam3CSK4,RT-PCR和ELISA分别检测促炎细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-8的基因变化和蛋白表达水平;Western Blot方法检测信号分子ERK、JNK、P38的磷酸化水平和NF-κB抑制分子IκB-α的蛋白水平;利用信号分子的抑制剂U0126、SP600125、SB203580和BAY 11-7082分别阻断相应的信号传导,再加入Pam3CSK4,RT-PCR检测促炎细胞因子的基因表达水平。rn 结果:与Pam3CSK4单独作用THP1细胞相比,雷帕霉素预处理THP1细胞后,促炎细胞因子的基因和蛋白水平均有下降.阻断AKT通路后促炎细胞因子的表达没有降低反而显著升高,提示雷帕霉素的抑制作用与AKT-mTOR信号通路无关.RT-PCR结果显示:信号分子ERK和NF-κB通路被阻断后,炎症因子的表达明显下降,而JNK和P38被阻断后,则无明显变化.Western blot结果显示:雷帕霉素预处理THP-1细胞后,Pam3CSK4所诱导的ERK、JNK、P38的磷酸化水平明显下降、IκB-α蛋白水平则明显上调。rn 结论:雷帕霉素通过抑制ERK和NF-κB信号通路下调TLR2诱导的炎症反应。