胰岛素对ALL细胞株耐药性的影响及以IGF-1R作为靶点在抗ALL细胞增殖中的作用

摘要

目的：探讨胰岛素对ALL细胞株耐药性的影响以及IGF-1R在ALL细胞中的表达特点及其作为靶点在抗白血病治疗中的作用.rn 方法：CCK-8法分别检测不同浓度DNR、不同浓度DNR+胰岛素作用ALL细胞株(Jurkat、Reh)后细胞抑制率;Annexin V-FITC/PI双染色法检测胰岛素对柔红霉素(DNR)引起的ALL细胞凋亡的影响;采用不同浓度的Anti-IGF-IRantibody(ab16890)及胰岛素共培养ALL细胞后流式细胞术检测不同样本细胞表面IGF-IR的表达并检测细胞凋亡率,同时采用western blot法检测IGF-1R与其配体介导的AKT/mTOR通路蛋白p-AKT、p-P70S6、p-mTOR的表达;采用浓度为1μg/ml的ab16890及胰岛素共培养ALL细胞后,上机检测细胞周期,并与阴性组进行比较.rn 结果：与不加用胰岛素的对照组相比，不同浓度柔红霉素与胰岛素联合培养可使ALL细胞生长抑制率降低;采用胰岛素与柔红霉素共同培养ALL细胞比单独使用柔红霉素作用后细胞凋亡率明显降低。rn 结论：胰岛素能促进ALL细胞的生长，减少凋亡，可能增加ALL细胞对柔红霉素的耐药性;Anti-IGF-IRantibody(ab16890)能够促进细胞凋亡，同时下调细胞表面IGF-IR表达，使细胞周期停滞在GO/GI期，蛋白水平检测发现相关通路蛋白表达具有减少趋势，提示该单抗通过中和细胞表面IGF-1R促进细胞凋亡，机制可能是通过抑制配体与IGF-IR结合介导的AKT/mTOR途径，从而减弱其介导通路的下游生物学效应。