铁过载对成骨细胞内铁稳态及生物活性的影响

摘要

目的:了解铁过载对成骨细胞铁稳态及生物活性的影响.rn 方法:34℃条件下体外培养人成骨细胞(hFOB1.19),以不同浓度(50、100、200μmol/L)枸橼酸铁铵(FAC)干预,用RT-PCR检测成骨细胞铁调节基因膜转铁蛋白(FPN1)、转铁蛋白受体(TfR)和二价金属转运蛋白1(DMT1)表达的变化;用激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察成骨细胞内的铁离子荧光强度;流式细胞仪检测成骨细胞内活性氧(ROS)水平;碱性磷酸酶活性试剂盒检测碱性磷酸酶活性;Von kossa染色法行钙结节染色.rn 结果: 与对照组相比，FAC干预48h后FPN1 mRNA的表达随 FAC干预浓度增加呈剂量依赖性上调，TfR、DMT1 mRNA的表达呈剂量依赖性下调（P<0.05）；FAC干预48h后成骨细胞内铁离子荧光强度剂量依赖性减弱，与对照组相比差异有统计学意义（P<0.05）；48h后成骨细胞ROS水平随FAC干预浓度增加呈剂量依赖性升高（P<0.05）；FAC干预10d后各组成骨细胞碱性磷酸酶活性均随FAC浓度增高而降低，差异有统计学意义（P<0.05）；与对照组相比，FAC干预17d后成骨细胞钙结节染色显示矿化面积和钙结节形成随FAC浓度增加而减少。rn 结论:铁过载对成骨细胞生物活性有明显抑制作用，其机制可能与细胞内铁离子浓度增加及活性氧水平升高有关。