黄酮类化合物山萘酚对皮肤瘢痕形成及纤维化作用研究

摘要

目的:研究黄酮醇类化合物山萘酚对皮肤愈合及更新的影响。rn 方法:材料:在P6小鼠无创模型背部一侧涂抹(平行做皮下注射)合适浓度的山萘酚溶液3-5天，对侧皮肤涂抹(注射)溶剂对照，在尾静脉注射105数量级P-2GFP+BMMSC，24h, 48h免疫荧光检测药物侧皮肤GFP+细胞归巢情况。在大耳白免耳部制作lcm直径圆形瘢痕创伤，在瘢痕形成过程中不断涂抹合适浓度药物以及对照溶剂，另一批在瘢痕形成后涂抹药物以及溶剂对照，21天、28天时取材观察瘢痕形成及退化情况，比较瘢痕形成指数、瘢痕组织成纤维细胞增殖、炎症浸润以及相关因子表达情况。以Balb/c小鼠背部皮下注射博莱霉素构建系统性硬化症模型，在注射药物同时以及模型鉴定成功之后于背部皮肤硬化处涂抹合适浓度山萘酚溶液并设置对照，对比小鼠背部皮肤纤维化症状、α-SMA成纤维细胞增殖、炎症浸润情况，以及成纤维细胞周期调节蛋白上游通路表达情况.根据以上体内现象，做山萘酚与BMMSC以及激活下细胞共培养实验，验证山萘酚对BMMSC免疫调节能力的影响，并做Transwell迁移实验，验证山萘酚对BMMSC以及fibroblast迁移能力影响.rn 结果:一定浓度的山萘酚能在体内趋化循环的GFP+BMMSC到达药物处理部位.山萘酚能在体内抑制瘢痕形成，处理组瘢痕形成指数SEI较对照组明显降低，而且两组之间炎症浸润情况相似。一定浓度的山萘酚处理Balb/c小鼠背部硬皮病病变组织，可以显著抑制由博莱霉素注射引起的真皮纤维化。山萘酚体外与BMMSC共培养可以提升其炎症应激条件下的免疫调节能力，这并不是由于后者增殖引起，这与山萘酚直接抑制激活的T细胞增殖活性相互独立。以上性质可在体外由细胞学实验验证。rn 结论:合适浓度的山萘酚可以抑制兔耳模型瘢痕形成，以及由博莱霉素引发的皮肤纤维化症状。以上过程不仅有赖于山萘酚抑制成纤维细胞增殖的活性，也有赖于其趋化并提高BMMSC免疫抑制能力的活性。