IVIG体外对Hep-3B、Hep-LO2及HuMSCs细胞细胞周期及凋亡的影响

摘要

目的：静脉注射用免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)可作为免疫调节剂来治疗多种免疫系统疾病.研究发现：肿瘤与自身性免疫有不少相似特征.体外实验证明IVIG对不同的肿瘤细胞生长和扩散有抑制效果,动物模型显示IVIG抑制肿瘤在体内的扩散.临床文献报道WIG被直接用于各种肿瘤的治疗,有一定的临床效果.但是,IVIG对肿瘤的治疗作用、治疗剂量尚未有统一的共识,其作用机理亦不明确.既往研究发现IVIG对肿瘤细胞增殖特性有影响.本研究拟探讨IVIG对人肝癌细胞(Hep-3B细胞)、人正常肝细胞(Hep-LO2细胞)、人脐带间充质干细胞(HuMSCs细胞)细胞周期的影响以及诱导细胞凋亡的作用,初步阐明IVIG治疗肿瘤的可能作用机制.rn 方法：复苏Hep-3B细胞和Hep-L02细胞；采用差异贴壁法分离、培养、扩增出HuMSCs细胞；分别接种l×106个/ml的Hep-3B细胞、Hep-L02细胞及HuMSCs细胞进行培养。待细胞贴壁后加入不同浓度的JVIG (0、5.Omg/ml、12.5mg/ml、25.Omg/ml)，动态观察细胞生长状态，加药后24h和48h，利用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡。rn 结果：IVIG对Hep-3B细胞的影响：作用24h后GO/G1期细胞比例上升(P<0.05)，G2/M期细胞比例下降(P<0.05)；作用48h的25.Omg/ml组使S期细胞比例上升(P<0.05)，G2/M期比例下降(P<0.05)；IVIG对Hep-L02细胞的影响：作用24h及48h后G2/M期细胞比例上升；作用24h及48h后Hep-L02细胞凋亡率增加(P<0.05)。IVIG对HuMSCs细胞的影响：作用24h和48h后G0/G1期细胞比例上升(P>O.05)。rn 结论：IVIG能抑制Hep-3B细胞的凋亡，其机制可能与其对细胞周期的调节相关，可能通过阻滞GO/GI期起作用。IVIG能促进Hep-L02细胞的凋亡，具有剂量和时间依赖性，即浓度越高，促进凋亡作用越强，且初期作用强，随着作用时间延长，后期作用减弱，其机制可能与其对细胞周期的调节相关，可能通过阻滞G2/M期起作用。低浓度的IVIG能促进HuMSCs细胞的凋亡。高浓度的IVIG能抑制HuMSCs细胞的凋亡，且抑制凋亡作用初期弱，随着作用时间延长，后期抑制凋亡作用增强，其机制可能通过G2/M期阻滞起作用。