运送禽流感病毒DNA疫苗的重组减毒沙门氏菌的实验室免疫效力研究

摘要

本文将带H5N1型禽流感病毒HA基因的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207(pVAX1-HA)、SL7207(pVAX1-HA-CpG)、SL7207(pcDNA3.1-HA)、SL7207(pcDNA3.1-HA-CpG)、SL7207*(pcDNA3.1-HA)分别以5×109CFU的剂量两次口服免疫4日龄商品代伊莎褐蛋鸡.二免后3周,试验鸡用禽流感病毒JSGO(H5N1)进行攻击.二免后三周称重实验显示,重组沙门氏菌免疫组与对照组间没有显著性差异(P＞0.05).测定首免后2周和二免后3周血清抗体效价以及二免后3周小肠黏膜抗体效价,结果显示,重组菌SL7207(pVAX1-HA)免疫组、SL7207(pVAX1-HA-CpG)免疫组、SL7207(pcDNA3.1-HA-CpG)免疫组、SL7207*(pcDNA3.1-HA)免疫组都能激发机体产生黏膜免疫应答,且与空载体组、空白对照组以及油苗组之间存在显著性差异(P＜0.05).攻毒免疫保护结果显示,SL7207(pVAX1-HA-CpG)免疫组、SL7207(pcDNA3.1-HA-CpG)免疫组、SL7207*(pcDNA3.1-HA)免疫组与空载体组和空白对照组之间存在显著性差异(P＜0.05),而SL7207(pVAX1-HA)和SL7207(pcDNA3.1-HA)与空载体组和空白对照组之间不存在显著性差异(P＞0.05),说明载体菌SL7207*的运送能力优于SL7207,未甲基化CpG的联合应用可以增强DNA疫苗的免疫效果.本研究为进一步优化基于黏膜免疫途径的新型禽流感基因工程粘膜疫苗奠定了基础.