口蹄疫重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTAL3CP1的构建与遗传稳定性研究

摘要

本文选用鸡痘病毒作为载体,将FMDV的衣壳蛋白前体P1-2A和蛋白酶3C基因插入到鸡痘病毒表达载体中,构建重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL3CP1,并与鸡痘病毒282E4株共转染鸡胚成纤维细胞,通过药物BrdU加压筛选、间接免疫荧光实验以及Westernblotting方法检测等方法筛选并获得了一株重组鸡痘病毒.重组鸡痘病毒vUTAL3CP1接种鸡胚成纤维细胞连续传30代,分别对第1、5、10、15、20、25、30代传代毒进行病毒毒价测定和PCR、RT-PCR鉴定.结果表明,重组鸡痘病毒vUTAL3CP1在SPF鸡胚成纤维细胞传30代,其病毒毒力未返强,FMDV3CP1基因未发生缺失和变异.