替沃扎尼通过细胞周期休止抑制甲状腺癌细胞和血管内皮细胞增殖

摘要

目的:研究新型酪氨酸激酶抑制剂替沃扎尼(tivozanib)对甲状腺癌细胞SW579和血管内皮细胞(VEC)增殖的作用影响及机理.rn 材料与方法:将SW579和VEC分别暴露于1、2、4、8和16 μM的替沃扎尼72h,未接受替沃扎尼处理的细胞作为对照.采用CCK-8法细胞活度测定、图像分析技术及细胞分裂纺锤体免疫荧光染色,观察替沃扎尼对细胞生长增殖的影响,以细胞活度、细胞密度、细胞生长率和细胞分裂指数评价细胞的增殖能力,应用流式细胞仪进行细胞周期时相分析.rn 结果:细胞活度测定显示,替沃扎尼可明显抑制SW579和VEC两种细胞的生长增殖,均呈浓度依赖性,两种细胞的IC50分别约为4μM和8μM.图像分析显示,在IC50的替沃扎尼作用下,SW579和VEC两种细胞的生长密度和生长率明显降低.细胞分裂纺锤体免疫荧光染色显示,替沃扎尼可使两种细胞的分裂指数明显下降,在IC50的替沃扎尼作用48h时,SW579的分裂指数(0.89％)明显低于对照细胞(2.21％),P＜0.05,VEC的分裂指数(2.26％)亦明显低于对照细胞(3.98％),P＜0.01.细胞周期时相分析显示,在IC50的替沃扎尼作用48h时,SW579发生明显的G1期细胞周期休止,G1期细胞比例(72.5％)明显高于对照细胞(54.5％),P＜0.05;而VEC出现明显的G2/M期细胞周期休止,G2/M期细胞比例(48.6％)明显高于对照细胞(14.1％),P＜0.05.rn 结论:酪氨酸激酶抑制剂替沃扎尼对甲状腺癌细胞和血管内皮细胞的增殖均具有明显的抑制作用,其作用可通过细胞周期休止作用而实现,但两种细胞所诱发的细胞周期休止时相不同,提示替沃扎尼对两种细胞增殖抑制作用的机理不同.