氯化高铁血红素和热应激对JWA基因表达的影响

摘要

[目的]探讨JWA基因在氯化高铁血红素(hemin)和热应激单独或联合作用下的表达规律. [方法]用Westernblot方法检测JWA蛋白表达;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测JWAmRNA表达变化;用氯霉素乙酰转移酶-酶联免疫吸附测定(CAT-ELISA)方法检测hemin和热应激对JWA基因近端启动子转录活性的影响. [结果]50μMhemin处理K562细胞1w可使JWA蛋白表达增高(3.23±0.57倍);而30μMhemin处理K562细胞48h可使JWAmRNA表达增加(1.37±0.06倍).42℃处理K562细胞2h可使JWA蛋白表达增高(8.00±1.73倍);42℃处理K562细胞30min可使JWAmRNA表达显著升高(1.87±0.13倍).hemin和热应激联合作用于K562细胞后,JWA蛋白和mRNA的表达均低于单独处理.CAT-ELISA结果显示hemin及热应激单独处理可上调各自反应元件的应答,但二者联合作用后反应元件的应答似乎呈现一种部分拮抗的作用. [结论]hemin和热应激可能分别通过JWA近端启动子上各自的反应元件而调节JWA基因的表达.