改良乙肝表面抗原ELISA检测质量控制方法的初步探讨

摘要

目的：探讨乙肝表面抗原(HBsAg)ELISA检测的质量控制方法，以提高HBsAg的检测质量；方法：收集新鲜无溶血、无黄疸、无细菌污染的阴性与阳性血清，经灭活处理后，阳性血清用定值HBsAg质控血清进行标定，并稀释得含量分别为0.2，0.5，1.0，2.0，5.0ng/l，分装安瓿或离心管中，-20℃保存，用使用试剂盒按照NCCLS-EP文件要求对系列质控物进行重复试验，常规室内质控选择计算S/CO×(1-3CV％)>1(CV％为ELISA的批间变异一般定为15％)的弱阳性质控血清，作为室内质控使用，实际工作中用”即刻法”与levey-jennings法进行室内质控。当改变试剂盒批号后，为了使室内质控图继续使用，用新批号试剂盒测定上述系列血清。对新旧批号系列质控血清测定值(S/CO)进行相关回归处理得一直线方程y=a+bx，根据直线方程将室内质控所选质控血清的S/CO值换算回去，在质控图上继续作图；结果：HBsAg系列质控血清ELISA测定的批间变异分别为11.50％、13.85％、14.95％、13.27％、10.15％；更换试剂批号后S/CO的最佳回归方程为y 原=1.069x新-0.1812(r=0.9994)；结论：用该方法建立的HBsAg定性ELISA试验室内质控物的选择与更换试剂批号后室内质控图的继续使用方便实用。