55.3种HBV DNA定量PCR试剂结果比较及假阴性分析

摘要

目的 探讨国内市场上3种HBVDNA荧光定量PCR试剂的特异性及敏感性,并对其假阴性结果进行分析.方法 对211例HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+)(以下简称"大三阳")的血清标本进行平行HBVDNA定量检测,比较3种试剂检测结果的敏感性及其与HBeAg滴度的相关性.在扩增靶基因序列上下游设计引物对HBVDNA检测结果为阴性及部分阳性的血清标本进行HBVDNA扩增和序列分析和临床资料分析,探讨产生假阴性的原因.结果 3种PCR试剂检测HBV DNA结果分别为A(5.85±1.64 logcopies/mL)、B(6.17±1.84 log copies/mL)、C(5.53±1.81 log copies/mL),后两组间比较具有显著性差别(P＜0.003).采用3种试剂阴性结果比例分别为2.36％(5/211)、1.08％(2/185)、3.2％(5/161)拷贝/mL;低于检测下限的比例分别为0.094％(2/211)、3.78％(7/185)、7.45％(12/161).结论 不同厂家PCR检测试剂的结果之间可以存在显著性差别,提示在临床随访时必须采用相同试剂检测结果."大三阳"血清标本阴性结果的原因有临床抗病毒治疗直接抑制病毒DNA所致,也可以是因为检测试剂的荧光探针结合区序列突变,造成PCR产物量不能通过荧光强度反应出来.