基因工程化分泌神经营养因子-3的鼠胚神经干细胞实验研究

摘要

目的：探索以Lentivirus为载体，构建同时表达绿色荧光蛋白(greenfluorescence protein，GFP)和神经营养因子-3(neurotrophicfactor-3，NT-3)的基因工程化鼠胚神经干细胞(neural stem cell，NSC)的可行性。rn 方法：体外分离培养鼠胚NSC，用同时携带NT-3和GFP的lentivirus转染构建工程化NSC；用荧光显微镜、鼠胚背根神经节培养(Dorsal Root Ganglion，DRG)、Western blot等方法检测基因工程NSC的转基因表达。rn 结果：荧光显微镜观察到几乎100％的工程化NSC表达GFP;DRG培养和Western blot检测到基因工程化NSC能高效分泌NT-3蛋白。rn 结论：以Ientivirus为载体，构建同时携带并稳定表达GFP和NT-3的基因工程化鼠胚NSC是可行的，可为脊髓损伤基础研究提供有价值的细胞资源。