HPLC-MS同时测定血浆中文拉法新及其三种代谢物的浓度

摘要

目的：建立一种高效液相色谱一质谱联用法同时测定人血浆中的文拉法新和其三种代谢产物：氧去甲基文拉法新、氮去甲基文拉法新和氮氧双去甲基文拉法新的浓度。rn 方法：血样采用经典液相萃取法，血浆样品碱化后用乙醚提取两次，合并吹干用流动相定容，再用BDSHYPERSILC18column(5μm，250mm×4.6mm)柱分析;流动相为(30mmol/L，醋酸铵+1‰甲酸+0.1‰三氟乙酸)：乙腈=40∶60，并且采用线性梯度洗脱，梯度由40∶60至54∶46.内标为艾司唑仑;质谱仪采用选择性离子通道模式检测，通道Ⅰ选择m/z为295.0的离子检测内标，通道Ⅱ选择m/z为232.3和250.4的离子检测氮氧双去甲基文拉法新，通道Ⅲ选择m/z为246.4和264.4的离子检测氧去甲基文拉法新和氮去甲基文拉法新(因为它们的分子量相同)，通道Ⅳ选择m/z为260.4的离子检测母药文拉法新。rn 结果：文拉法新的线性范围为0.4-1400ng/ml，氧去甲基文拉法新为0.2-900ng/ml，氮去甲基文拉法新为0.3-1000ng/ml，氮氧双去甲基文拉法新为0.2-750ng/ml。他们的萃取回收率均高于73％，方法回收率均高于76％。日内RSD分别小于5％和4％(n=3)。rn 结论：本方法准确，灵敏，稳定可靠，可用于文拉法新及其代谢物的人体药动学研究和临床治疗药物监测。