口蹄疫感染与免疫动物鉴别诊断方法的建立

摘要

构建重组杆状病毒的转座质粒pFastBac-3AB,再将该重组质粒转化DH10 Bac感受态细菌,在体内进行重组,并经三重抗性与蓝白斑筛选,得到杆状病毒重组杆粒Bacmid-3AB;将Bacmid-3AB转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒.用重组杆状病毒表达的3AB蛋白为抗原建立鉴别口蹄疫感染与免疫动物的ELISA诊断方法,并对各种反应条件进行优化,包括抗原包被时间、包被浓度、封闭剂、酶标抗体工作浓度等,制定了检测抗体的间接ELISA操作程序,确定检测样品的临界值.