[目的]探讨与GSTP1解毒功能相关的包括SNP、mRNA水平、启动子区CpG岛甲基化和蛋白质水平等多种遗传和表遗传特征与食管癌发病风险的关系,以评价GSTP1基因在食管癌遗传易感性中的意义.[方法]采用病例对照研究方法,对江苏淮安的97例新发食管癌病例和匹配的97例健康对照人群采集的外周血样本依次提取总RNA、DNA和总蛋白,应用限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术测定GSTP1基因第五外显子Ile105Val多态的基因型,采用SYBR GREEN I实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定其外周血的mRNA水平,应用甲基化特异性PCR(MSP)分析启动子区CpG岛的甲基化状态,应用Western Blotting技术对GST-π的水平进行半定量分析;应用方差分析、x2检验和logistic回归分析评价基因的各个特征与食管癌的关联.[结果]GSTP1第五外显子的Ile105Val多态在病例组和对照组中的分布差异无统计学意义(OR=1.230,95％CI=0.712～2.123),而mRNA表达水平在食管癌病例组中显著降低,其与食管癌发病风险的关联强度可达2.072(95％CI:1.11～3.85),对97对外周血样本启动子区CpG岛甲基化的分析结果表明病例与对照的甲基化率有显著性差异,条件logistic回归分析显示GSTP1基因启动子区CpG岛的过甲基化可使食管癌患病风险增加5.60倍(95％CI=2.652～16.421),但该基因的异常甲基化未显示与mRNA表达水平的降低有关,GSTP1表达的蛋白质在病例组和对照组中水平有显著差异,logistic回归分析显示调整年龄、性别、吸烟和饮酒后OR可达3.548;在这些遗传特征之间,mRNA的表达水平在病例组中与蛋白含量呈正相关(P＜0.05),但相关性较弱(R=0.220),在对照组中未能发现两者之间的关联,而Ile105Val多态和CpG岛的甲基化状态均与GST-π蛋白的水平没有统计学上的相关性.[结论]GSTP1基因的功能异常与食管癌发病风险增加有统计学关联,可能是食管癌的遗传易感基因,其功能异常主要体现为mRNA和蛋白质表达水平的下调;启动子区CpG岛的过甲基化可能并不是食管癌易感个体的遗传特征,但是可以作为食管癌早期诊断和预后的指标反映外周血中可能存在的循环肿瘤细胞.
展开▼
