荧光PCR检测人外周血淋巴细胞中FOXP3 mRNA的表达及初步应用

摘要

目的：建立实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应(real - time quantitative，RT-PCR)检测人外周血淋巴细胞中FOXP3 mRNA表达的方法，并验证其与流式细胞术检测CD4+CD25+Treg表达的相关性。 rn 方法：提取人外周血单个核细胞总RNA，逆转录成mRNA，采用实时荧光定量RT- PCR检测哮喘急性发作患儿及同龄对照的FOXP3 mRNA表达；同时采用流式细胞技术检测CD4+CD25+ Treg的比例。rn 结果：患儿组FOXP3 mRNA的表达一般低于对照组(P<0.05)，与CD4+CD25+Treg的比例有一定的相关性。rn 结论：本研究所建立的用于检测人外周血淋巴细胞中FOXP3 mRNA表达的实时荧光定量RT-PCR方法，是一种快速有效、灵敏度高、特异性好的定量检测方法，与流式细胞术检测CD4+CD25+Treg表达具有良好相关性，哮喘患儿CD4+CD25+Treg明显降低可能参与哮喘发病，FOXP3表达降低可能是导致CD4+CD25+Treg发育障碍的重要因素。