应用定量蛋白质组技术鉴定CD40受体的动态相互作用蛋白质

摘要

本研究建立SILAC定量技术并用于鉴定CD40信号通路激活过程中的动态相互作用蛋白。根据配体激活CD40激活点实验，选择研究CD40配体刺激10min的动态相互作用蛋白，实验选用了传统的SILAC实验步骤即PAM和改进的SILAC实验步骤来完成实验。在这些鉴定的蛋白中有一些可能参与CD40信号通路的蛋白，其中与NFKB信号通路相关的蛋白有NFKBp100、NFKB activator 1等，与泛素蛋白醉体通路相关的有OTIJBl ,NEDD4等，还有一些具有其他重要功能蛋白有NEDDI等，现在以对其中的蛋白进行进一步验证以及功能探索，其中通过Westenblot，已经验证了NEDD4与CD40的相互作用，它的发现为CD40信号通路的调控及其机制的研究提供了重要的线索。