SK-N-SH暴露于汞化合物后差异表达蛋白的研究

摘要

本研究采用神经母细胞瘤SK-N-SH作为体外神经元模型，用甲基汞(MeHg)和氯化汞(HgCl2)暴露SK-N-SH细胞24h，利用Alamar blue法检测了HgCl2和MeHg的细胞毒性。结果显示，HgCl2和MeHg的半数致死剂量分别为HgCl290uM,MeHg15um。在后续双向电泳实验中，选取最大无效应浓度(HgCl210uM、MeHg 250nM)作为暴露剂量。同时优化了细胞蛋白提取条件，在细胞裂解液中增加了DTT和核酸酶，同时采用与质谱兼容的高灵敏银染方法进行染色。用改进的电泳方法对SK-N-SH暴露于汞化合物和空白对照组蛋白质进行双向电泳分离，结果显示其分辨率高，用银染方法可分辨1000多个蛋白点，它们的等电点和分子量主要分布在pI4-7和50kD-130kD之间。差异蛋白点有待于继续进行后续的软件分析及质谱鉴定。