鸡CD3分子单克隆抗体及其免疫生物学特性

摘要

研制抗鸡CD3分子特异性单克隆抗体(mAb)。用重组真核表达质粒pcDNA3.1-CD3免疫6周龄BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,制备抗鸡CD3分子mAb。共获得7株特异性分泌抗鸡CD3分子的mAb,分别命名为1A10、3E3、3G10、5F3、8D1、9E7和15A11,mAb腹水ELISA效价在1:3200～1:25600,间接免疫荧光(IFA)效价在1:800～1:6400之间,其中除15A11为IgG2a亚类外,其余均为IgM亚类。mAb反应谱测定结果显示,9E7、5F3和3E3与所试验的8个品种鸡的脾脏淋巴细胞均能反应,其他mAb与这些品种鸡的脾脏淋巴细胞反应不一。重组质粒pcDNA3.1-CD3转染COS-7细胞,以上述mAb检测表达产物结果表明,所有mAb均能与表达产物反应。FACS分析结果显示,9E7和5F3出现了较明显的阳性峰。本研究所制备的抗鸡CD3分子mAb为鸡细胞免疫应答的检测与分析提供了良好的生物材料。