山羊β-乳球蛋白基因侧翼区的克隆和序列分析

摘要

目的：克隆奶山羊β-乳球蛋白基因5'、3'调控区并对其进行序列分析。方法：从徐淮奶山羊组织中提取基因组DNA，采用高保真长模板PCR法克隆得到山羊β-乳球蛋白基因4.2kb的5'调控区和1.8kb的3'调控区.将纯化后的PCR产物克隆到pGEM-T Easy载体中，经酶切鉴定和序列测定验证克隆的正确性。结果：部分序列分析表明，5'区与GeneBank中登录的山羊和绵羊BLG基因5'区同源性分别为100％和95％;3'区与这些动物的同源性分别为99％和93％。克隆得到的奶山羊BLG调控区与山羊BLG伪基因显著不同，5'区和3'区同源性分别为83％和88％。结果表明，克隆得到的奶山羊BLG调控区可用于构建乳腺特异性表达载体，为指导外源基因在转基因动物乳腺中的高效表达奠定了基础。