猪流感病毒神经氨酸酶基因(N1和N2)在昆虫细胞中的表达

摘要

根据GenBank发表的N1和N2亚型猪流感NA基因序列设计引物，扩增出NA基因片段，将其克隆到pFastBacGP67A和pFastBacGP67C杆状病毒载体上，筛选阳性重组转座载体pFastBacGP67A-N1和pFastBacGP67C-N2，转化含有杆状病毒穿梭载体(Bacmid)的DH10Bac感受态细胞，构建杆状病毒表达载体获得重组转座子rBacmid-N1和rBacmid-N2，在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞，获得重组杆状病毒rBv-N1和rBv-N2，再感染细胞，收获目的蛋白。通过SDS-PAGE蛋白电泳、免疫印迹法、免疫组化分析表明该蛋白得到表达，且具有良好的生物学活性。