猪流感病毒M基因实时荧光定量PCR诊断方法的建立

摘要

根据猪流感病毒(SIV)M基因的保守序列，使用Primer Express 2.0软件设计并合成一套特异性引物和TaqMan MGB探针，建立了SIVM基因实时荧光定量PCR检测方法。使用含有选定检测序列的重组质粒pMD-M标准品做标准曲线，结果表明：该方法的灵敏度1EID50，标准曲线的相关系数为0.99949，组间与组内重复试验变异系数分别为0.21%，0.65%，除猪流感病毒外，其他5种猪病病毒检测均为阴性，样品检测与病毒滴定及病毒分离结果的符合率均为100%，该方法特异性好、重复性佳，为SIV检测提供了一种特异、敏感、快速的定量检测方法。