转hLIF基因饲养层细胞的建立及其对脐血CD34+造血干/祖细胞的扩增作用

摘要

目的:建立转基因饲养层细胞,观察对CD34+造血干/祖细胞的扩增作用。rn 方法:建立转LIF基因的逆转录病毒饲养层细胞及转hLIF基因的腺病毒饲养层细胞,并用RT-PCR法鉴定目的基因;采用免疫磁珠法分离脐带血CD34+造血干/祖细胞,流式细胞术检测纯度;将CD34+造血干/祖细胞与饲养层细胞共培养,流式细胞术检测各组增殖效果.rn 结果:建立的两种饲养层细胞均有绿色荧光,RT-PCR法证实均有目的基因表,免疫磁珠法分离的CD34+造血干/祖细胞纯度可达95.6±2.58%,与饲养层细胞共培养后CD34+造血干/祖细胞可分别扩增8.74倍和13.20倍,表面粘附分子表达量仍较高.rn 结论:建立的两种转基因饲养层细胞对CD34+造血干/祖细胞均有一定的扩增作用,且延缓其分化.