结核分枝杆菌特异性分泌蛋白原核表达和纯化

摘要

我国面临严峻的结核病疫情,早期、准确、快速的诊断活动性结核病对及早识别传染性病例,治疗,管理传染源,控制结核分枝杆菌的传播、流行,降低对健康人群的危害发挥重要的作用。然而,长期以来缺乏灵敏、特异、快速的活动性结核病的诊断方法。目前应用的诊断方法都有一些不足之处,因此开发更好的诊断方法已成为当务之急。结核分枝杆菌感染早期,分泌性蛋白及细胞壁蛋白是宿主免疫系统重要的抗原靶位。结核杆菌有上百种分泌蛋白,如果在体液中检测到分泌蛋白的抗体,则说明细菌在体内处于活动(复制)状态,因此与体液免疫特异相关的分泌蛋白可作为诊断活动性结核病的重要分子标识。已经证实在结核分枝杆菌标准株H37Rv中GlcB及MPT51蛋白为分泌性蛋白,并且主要参与体液免疫。本研究中构建了glcB、mpt51基因的高效原核表达载体,并进行了表达、鉴定和纯化,为建立可取代现有诊断技术的新型诊断方法奠定了基础。