石杉碱甲人工抗原的合成鉴定及免疫原性分析

摘要

目的 制备乙酰胆碱脂酶抑制活性成分石杉碱甲(Huperzine A，HupA)的人工抗原及抗血清，为制备HupA的单克隆抗体、建立快速检测HupA的酶联免疫吸附测定(ELISA)法提供技术基础。 方法 将HupA与戊二醛(glutaraldehyde，GA)、载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)反应偶联，制得半抗原-载体蛋白复合物后，用基质辅助激光解吸飞行时间质谱测定其中结合的半抗原数目;以此抗原免疫BALB/c小鼠，制备抗血清，并通过ELISA法检测其抗体效价和特异性。结果 合成的人工抗原HupA-GA-BSA中HupA与BSA的结合比约为8：1；免疫小鼠得到特异针对HupA的抗血清，HupA抗体的效价为1：12500。结论 成功地合成了HupA的人工抗原，且该抗原有较好的免疫原性。