抗青霉素单克隆抗体的制备及初步应用

摘要

目的：制备抗青霉素的单克隆抗体(mAb)并建立双抗体夹心ELISA检测方法，对临床上引起青霉素过敏反应的过敏原青霉噻唑蛋白进行研究。rn 方法：将半抗原青霉素和载体蛋白偶联后免疫BALB/c小鼠，应用杂交瘤技术建立稳定分泌抗青霉素mAb的杂交瘤细胞株。常规制备腹水，用辛酸硫酸铵法纯化，并对纯化的mAb进行特异性鉴定。通过对不同抗体组合的分析和条件的优化，建立检测过敏原的双抗体夹心ELISA方法。rn 结果：经细胞融合、筛选及克隆化，共获得9株稳定分泌抗青霉素mAb的杂交瘤细胞株，其中5株亲和力较高。建立了双抗体夹心ELISA相对定量检测方法，该方法灵敏度达到870U/L，平均回收率为107.81％，批内变异系数平均为6.7％，批间变异系数平均为9.3％，可用于A群链球菌制剂中青霉噻唑蛋白的检测。rn 结论：成功地制备了抗青霉素的mAb，并建立了相对定量检测青霉噻唑蛋白的双抗体夹心ELISA法。