大黄素对NRK细胞AQP2表达的调节效应及机制

摘要

目的：探讨大黄素对体外培养NRK细胞水通道蛋白2表达的调节效应及机制。rn 方法：体外培养NRK细胞，分为两步实验：第一步随机分为对照组和5mg/L，10mg/L，20mg/L大黄素处理组，采用间接免疫荧光定性NRK细胞AQP2表达，Westem Blot、半定量RT-PCR检测药物处理24 h后AQP2蛋白及mRNA的表达；第二步随机分为对照组，20mg/L大黄素，10mg/L 8-Bromo-cAMP、20mg/L大黄素+10mg/L 8-Bromo-cAMP，非放射性法检测药物处理24 h后的NRK细胞PKA活性水平。rn 结果：AQP2表达于NRK细胞的细胞膜，进一步的Western Blot及半定量RT-PCR结果显示，10,20mg/L大黄素培养液均可抑制NRK细胞的AQP2蛋白及mRNA的表达(P<0.05)。PKA活性结果显示，20mg/L大黄素能降低NRK细胞的PKA磷酸化水平(P<0.05)。rn 结论：大黄素可抑制NRK细胞AQP2基因转录与翻译，提示大黄的利尿作用可能与调节AQP2表达有关，而且有可能是通过PKA通路调节AQP2的表达。