黄芪对大鼠肾小管上皮细胞CTGF、α-SMA表达的影响

摘要

目的：观察黄芪含药血清对肾小管上皮细胞结缔组织生长因子(CTGF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMR)等的影响。rn 方法：体外培养肾小管上皮细胞(NRZ-52E)。分为3组：①10%正常大鼠血清组；②10%正常大鼠血清+TGF-β1组：③10%含黄芪大鼠血清+TGF-β1组。作用48h后，观察NRK-52E形态变化，RT-PCR法观察CTGFmRNA基因表达；Western blot法观察CTGF及α-SMA蛋白表达；流式细胞仪检测α-SMA表达。rn 结果：正常对照组NRK-52E细胞表达少量CTGFmRNA，加入含TGF-β1 10ng/ml刺激48h，CTGF表达量增加3.8倍，具有显著性差异(P<0.01)；同时加入黄芪血清，可以减弱43%TGF-β1对CTGF表达的刺激作用(P<0.05)。Western blot显示，正常NRK-52E细胞蛋白水平的CTGF表达很弱，TGF-β1刺激后，CTGF表达升高3.6倍(P<0.01)；同时加入黄芪血清，CTGF蛋白表达较加TGF-β1组减弱39%(P<0.05)；正常的NRK-52E细胞表达微量α-SMA蛋白，TGF-β1 10ng/ml刺激48h α-SMA表达呈明显升高4.2倍(P(0.01)；同时加入黄芪血清，明显抑制α-SMA的表达35%(P<0.05)。流式细胞仪检测结果示：TGF-β1 10ng/ml刺激48h，α-SMA阳性细胞表达百分率和平均荧光强度都增加(P<0.05)；加入含黄芪血清，α-SMA阳性细胞表达百分率和平均荧光强度较上组明显减弱(P<0.05)。rn 结论：正常NRK-52E细胞表达微量CTGF及α-SMA，TGF-β，可刺激CTGF及α-SMA，而含黄芪大鼠血清能抑制CTGF及α-SMA表达。