载ACE-shRNA/PEG化壳聚糖纳米粒对大鼠主动脉内皮细胞转染的研究

摘要

目的:研究载ACE-shRNA/PEG化壳聚糖纳米粒在不同时间段对大鼠主动脉内皮细胞目的基因的抑制能力。方法:采用离子交联法制备PEG化的壳聚糖纳米粒,并连接质粒；应用不同量的PEG化壳聚糖质粒纳米粒转染大鼠主动脉内皮细胞；采用最佳量对大鼠主动脉内皮细胞转染,采用实时荧光定量-PCR技术测定细胞中ACE mRNA(24h、48h、72h)的表达。结果:喷金扫描电镜检测显示载ACE-shRNA/PEG化壳聚糖纳米粒平均直径为70 nm:100ul的PEG化壳聚糖质粒纳米粒转染大鼠主动脉内皮细胞的转染率最高为(63.4±4.0)%,与其它量之间比较差异有统计学意义(P<0.05)；转染PEG/CS—NP/ACE—shRNA后24小时细胞ACEmRNA表达水平下降了(14.7±5.9)%,48小时为(53.6±5.4)%,72小时为(60.1±2.1)%。在48h时质粒对照组细胞的ACE mRNA表达水平下降了(0.6±0.3)%,阳性对照组下降了(1.3±0.7)%均与PEG/CS—NP/ACE—shRNA组相比有统计学差异(均P<0.05)。结论:PEG化壳聚糖质粒纳米复合物可以将重组质粒pACE-shRNA高效转染入大鼠血管内皮细胞,并沉默目的基因。